Comparación de métodos para la extracción y separación de proteínas de la orina
| Autor | Johanna Pedroza Díaz - Sarah Reithlisberger |
| Cargo | Docente de Cátedra Facultad de Ciencias Exactas y Aplicadas, Ingeniería Biomédica Medellín, Colombia - Docente Facultad de Ciencias Exactas y Aplicadas Medellín, Colombia |
| Páginas | 25-28 |
Quid, N°. 19, pp. 25-28, Jul-Dic, 2012, ISSN: 1692-343X, Medellín-Colombia
COMPARISON OF METHODS OF EXTRACTION
AND SEPARATION OF PROTEINS FROM URINE
COMPARACIÓN DE MÉTODOS PARA LA EXTRACCIÓN
Y SEPARACIÓN DE PROTEÍNAS DE LA ORINA
Mg. Johanna Pedroza Díaz
Instituto Tecnológico Metropolitano
Docente de
Cátedra
Facultad de Ciencias Exactas y Aplicadas,
Ingeniería Biomédica.
Calle 73 No 76A - 354 Vía al Volador, Medellín,
Colombia.
joha27@gmail.com
Mg. Sarah Reithlisberger
Instituto Tecnológico Metropolitano
Docente Tiempo Completo
Facultad de Ciencias Exactas y Aplicadas,
Ingeniería Biomédica, Grupo de Investigación e
Innovación Biomédica.
Calle 73 No 76A - 354 Vía al Volador
Medellín, Colombia.
sarahrothlisberger@itm.edu.co
(Recibido el 04-04-2012. Aprobado el 01-06-2012)
Resumen:
las proteínas son excelentes bi omarcadores pues proporci onan una indicación directa del estado
biológico, y pueden ser analizadas en los fluidos corporales. La orina ha despertado un gran interés en los últimos
años como fuente de biomarcadores, ya que es una ultrafiltración del plasma, su colección es mínimamente
invasiva y las muestras son fáciles de manejar. Sin embargo, ciertas características de la muestra, tales como la dilución
de las proteínas y el alto contenido de sal, present an desafíos para el análisis de proteínas . En este artículo c orto
se comparan cuatro métodos para la extracción de proteínas de la orina, concluyendo que la precipitación con acetona
produce los mejores resultados en cuanto a concentración de proteínas y resolución en electroforesis 2D. Este
método de extracción se puede realizar fácilmente en cualquier laboratorio sin la necesidad de kits comerciales.
Palabras clave:
electroforesis, extracción, orina, proteínas
Abstract:
proteins are valua ble biomarkers because they pro vide a direct i ndication of a biological stat e or
condition, and they can be assayed in body fluids. Urine has roused great interest in recent years as a source of
biomarkers, as it is an ultrafiltration of plasma, its collection is minimally invasive and samples are easy to handle.
However, certain features of the sample, such as the diluted protein concentration and high salt content, present their
own unique challenges for protein analysis. In this brief communication we compare four methods of protein
extraction from urine, and conclude that acetone precipitation yields the highest protein concentration, as well as the
best resolution of protein spots in 2D electrophoresis. This method of extraction can be easily performed in any lab
without the need for commercial kits.
Keywords:
electrophoresis, extraction, protein, urine.
1. INTRODUCTION
Proteomics, which studies the proteins expressed
by a system (called proteome), is an area that has been
widely researched in the past decade. Proteins are
directly res ponsible for carrying ou t most tasks
with in the cel l; there fore a cha nge in pro tein
expression levels is an indication of a pathological
process (Xiao et al., 2005). In the last ten years very
Sens itive te chnique s have bee n develo ped for
proteome analysis from biological samples such as
cells, tissues and body fluids (Fang & Zhang, 2008;
Patterson & Aebersold, 2003). This has led to the
discovery of biomarkers, which are molecules whose
expr essio n level s or chan ges in th e body ar e
indicative of a biological state (Goo & Goodlett,
2010 ), and which ca n b e u sed to assis t i n t he
diagnosis of a disease, to evaluate prognosis and to
monitor response to treatment.
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